一般来说，凡没有感染过乙肝病毒者都应该注射乙肝疫苗。
重点应用人群有两部分，一部分是新生儿、学龄前儿童，尤其是母亲在妊娠期间为病毒携带者的新生儿，另一部分是危险人群，包括接触乙肝病人的医护人员，直接接触血液、分泌物的医护人员，乙肝病人和乙肝病毒携带者的配偶，家庭成员或密切接触者。
接种了乙肝疫苗后，不一定都能预防乙肝病毒感染和乙肝发病，只有注射疫苗后能产生足量抗体的人，才有预防作用，足量抗体指乙肝病毒表面抗体滴度要在 1：10以上。注射后产生的保护性抗体不是永久性的，一般只能维持 3～ 5年，以后必须在医生指导下再加强注射。
注射乙肝疫苗后所产生的足量抗体只能预防乙肝病毒感染和乙肝发病。对其它类型的病毒性肝炎没有预防作用。接种者还可能感染甲、丙、戊、庚肝等病毒。注射乙肝疫苗前一定要检查乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗-HBs)和核心抗体(抗- HBc)，化验结果阴性者才可以注射，两岁以内的小儿如没有密切接触史，可以不用化验，直接注射乙肝疫苗。
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