对乙型肝炎的诊断，主要靠化验检查。常规检查有肝功能，包括血清胆红素（T-BiI）谷丙转氨酶（GPT）。乙肝表面抗（HBsAg）等。血清胆红素及谷丙转氨酶升高，均说明肝内有炎症。乙肝表面抗原阳性说明已感染了乙肝病毒。
如果乙肝表面抗原为阳性者，可进一步检查乙肝系列。它们分别为：（1）乙肝表面抗（HBsAg），（2）乙肝表面抗体（抗-HBs）。（3）e抗原（HBeAg）。（4）e抗体（抗-HBe）。（5）核心抗体（抗-HBc）。简单地讲；第（1）项代表感染。第（2）项代表抵抗力。第（3）项代表病毒复制。第（4）项须结合第（1）项分析；第（1）项阳性者第（4）代表病毒复制。第（1）项为阴性者，第（4）项阳性只能说明感染过乙肝把病毒已经痊愈。第（5）项阳性的临床意义与第（4）项大致相同。平时说的大三阳指第（1），（3），（5）项阳性，为急性期感染。平时说的小三阳指第（1），（4），（5）项阳性，多为慢性期感染。所谓的携带者，指第（1），（5）项阳性。乙肝患者痊愈后，多有第（2），（4），（5）项阳性或第（4），（5）项阳性或第（2），（4），（5）项单项阳性。
个别病人需做特殊检查，可检查HBV-DNA，PCR，以确定有无病毒复制。慢性患者，须查甲胎球蛋白（AFP），以排除肝硬化及肝肿瘤。除做化验检查外，肝病患者还应该做B型超声检查。
